產(chǎn)品名稱: 游離脂肪酸(FFA)含量檢測試劑盒

產(chǎn)品英文名: Free Aliphatic Acid Content Assay Kit

產(chǎn)品貨號：BC0590          產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣        產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價格：400
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
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簡要介紹：
FFA既是脂肪水解的產(chǎn)物，又是脂肪合成的底物。血清中FFA的濃度與脂類代謝、糖代謝、內(nèi)分泌功能有關(guān)。
    FFA與銅離子結(jié)合形成脂肪酸銅鹽，并溶于lv仿；利用銅試劑法測定銅離子含量，即可推算出游離脂肪酸含量。

產(chǎn)品詳細描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
    提取液：液體50 mL×1瓶，室溫保存。
    試劑一：自備。實驗前，取一個玻璃瓶，按照正geng烷：無水甲醇：lv仿=24:1:25的比例配置（自備），蓋緊后混勻，室溫保存。
    試劑二：液體16 mL×1瓶，室溫保存。
    試劑三：粉劑×2瓶，4℃保存。臨用前每瓶加入32mL無水乙醇充分溶解，4℃可保存一周。
    標(biāo)準品：粉劑×1支，10mg棕櫚酸，室溫保存。臨用前把試劑轉(zhuǎn)移到10 mL玻璃瓶中，加入
7.8 mLlv仿充分溶解，即為5μmol/mL的棕櫚酸標(biāo)準溶液。
產(chǎn)品說明：
    FFA既是脂肪水解的產(chǎn)物，又是脂肪合成的底物。血清中FFA的濃度與脂類代謝、糖代謝、內(nèi)分泌功能有關(guān)。
    FFA與銅離子結(jié)合形成脂肪酸銅鹽，并溶于lv仿；利用銅試劑法測定銅離子含量，即可推算出游離脂肪酸含量。
自備儀器和用品：
    研缽、冰、臺式離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、一個40mL玻璃瓶、一個10 mL玻璃瓶、正geng烷、無水甲醇、lv仿（三lv甲烷）、無水乙醇和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣品中FFA提取：
1、血清中FFA測定：將所取血液，室溫靜置1 h 后，于4 ℃離心機3500 rpm離心15min，取上層血清置于-20℃冰箱保存，待測。
2、組織中FFA含量測定：組織用生理鹽水沖洗干凈后，用吸水紙吸取表面水分，稱取約0.1g，加入1.0 mL提取液，勻漿后，8000rpm，4℃離心10min，取上清液，待測。
二、測定：
1. 分光光度計預(yù)熱30 min以上，調(diào)節(jié)波長到550 nm，無水乙醇調(diào)零。
2. 試劑二在37℃水浴中預(yù)熱30 min以上。
3. 標(biāo)準品的稀釋：將標(biāo)準品稀釋成1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0.05μmol/mL。
4. 按下表在1.5mL離心管中加入相應(yīng)試劑

三、FFA含量計算：
1.標(biāo)準曲線的繪制：
以標(biāo)準溶液的濃度為x軸，以ΔA標(biāo)準（ΔA=A標(biāo)準管-A空白管）為y軸，繪制標(biāo)準曲線，得到方程y=kx+b。將ΔA（ΔA=A測定管-A對照管）帶入方程得到x。
2.血清中FFA含量計算
FFA（μmol/L）=1000x

1. 組織中FFA含量計算

（1）按樣本蛋白濃度計算
FFA含量（μmol/mg prot）=x÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
FFA（μmol/g鮮重）=x×V樣總÷W
    V樣總：上清液總體積，1 mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣品質(zhì)量，g。
注意事項：
1.試劑三配制應(yīng)盡量晚配，可在操作到加入試劑二時，再配制試劑三。
2.必須保證每管的震蕩頻率及時間一致。
3.盡量在30min內(nèi)完成測量，并且測完后要密封好再丟棄。
4.因所用試劑多數(shù)為有機溶劑，同一支吸頭多次吸取會造成體積不準確，建議更換吸頭。

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