血清鐵濃度檢測試劑盒說明書
血清鐵濃度檢測試劑盒可見分光光度法規(guī)格為: BC1730 50T/48S
試劑一:粉劑×2瓶,4℃保存。臨用前配制,加入10 mL蒸餾水充分溶解。
試劑二:粉劑×2瓶,4℃保存。臨用前配制,加入313μL冰醋酸,加入10 mL蒸餾水充分溶解。
標準液:液體3mL×1瓶,1000μmol/L Fe3+標準液,4℃保存。臨用前稀釋8倍即125μmol/L的標準溶液進行實驗。
血清鐵是指血液中轉鐵蛋白所結合的鐵,該指標常用于鑒別缺鐵性與非缺鐵性貧血。
亞硫酸鈉還原血清Fe3+生成成Fe2+,F(xiàn)e2+進一步與2, 2’- 聯(lián)吡啶顯色,在520nm處有吸收峰,測定該波長光吸收值即可計算血清鐵含量。
可見分光光度計、離心機、可調式移液槍、1mL玻璃比色皿、輔助試劑和蒸餾水。
1. 分光光度計預熱30 min以上,調節(jié)波長到520 nm,蒸餾水調零。
2. 標準液:提前取出標準液稀釋8倍即125μmol/L。
3. 操作表:
加入試劑(μL)
空白管
測定管
標準管
蒸餾水
400
-
-
125μmol/mL標準液
-
-
400
血清
-
400
-
試劑一
400
400
400
試劑二
400
400
400
混勻后蓋緊,置于沸水浴5min,自來水冷卻;加入200 μL試劑(自備),充分震蕩混勻;室溫10000rpm,離心10min,小心吸取上層液700 μL,加入1mL玻璃比色皿,于520 nm立即測定吸光度,分別記為A空白管,A測定管,A標準管。
血清鐵含量(μmol /L)=[C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)]
= 125×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)
C標準液:125μmol/L Fe3+標準液。
1、血清鐵含量少,所用器皿(EP管)需要注意,避免被鐵污染。
2、試劑一和試劑二溶液不穩(wěn)定,需現(xiàn)配現(xiàn)用,新配制的試劑只能當天使用。
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