產(chǎn)品名稱：Hoechst 33258 熒光染料
產(chǎn)品型號：B8030-25
產(chǎn)品報價：
產(chǎn)品特點：Hoechst 33258 熒光染料說明：熒光色素；用于DNA、染色體和核酸的染色；熒光染色法和免疫熒光技術(shù)。
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Hoechst 33258 熒光染料
| 有效期 | 3年 |
|---|---|
| 英文名稱 | Hoechst 33258 |
| CAS | 23491-45-4 |
| 分子式 | C25H24N6O·3HCl |
| 分子量 | 533.88 |
| 儲存條件 | −20℃ |
| 純度 | Purity≥98%(TLC) |
| 外觀（性狀） | 黃色或綠色粉末 |
| 單位 | 支 |
別名：2'-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)- 2,5'-bi(1H-benzimidazole) trihydrochloride;2-[2- (4-Hydroxyphenyl)-6-benzimidazoyl]-6-(1-methyl-4- piperazyl)benzimidazole trihydrochloride;HOE 33258； Hoechst 33258
說明：熒光色素；用于DNA、染色體和核酸的染色；熒光染色法和免疫熒光技術(shù)。Hoechst 33258 是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，它在嵌入雙鏈 DNA 后釋放強烈的藍色熒光，對細胞的毒性較低。Hoechst 33258 常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測，也可以用于普通的細胞核染色，或常規(guī)的DNA染色。
物理性狀：黃色深黃色粉末；溶于水，黃或棕色溶液，參考濃度為9.80 - 10.20 mg/ml；熔點＞300℃。
用途：細胞遺傳學(xué)研究的常用試劑，熒光染色細胞的DNA ，插入DNA的A-T區(qū)，具有低的細胞毒性，形成膜滲透性熒光DNA鏈。
用于細胞核染色時，推薦的Hoechst 33258工作濃度為0.5-10μg/ml。
配制母液
Hoechst 33258溶于水，溶解度可達10mg/ml。因此可配制成10mg/ml的母液于4℃避光保存。
注意事項
1) Hoechst 33258 對人體有一定刺激性，請注意適當(dāng)防護。
2) 熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測。
3) 為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4) 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 用PBS或合適的緩沖液制備10～50µM Hoechst 33258染色液。
2. 固定的細胞或組織染色：
對于固定的細胞或組織樣品，固定后，適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色，則行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進行Hoechst33258染色。如果不需要進行其它染色，則直接進行后續(xù)的Hoechst 33258染色。
a) 對于貼壁細胞或組織切片：加入適量Hoechst 33258染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞：少加入待測染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。
b) 吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。
c) 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長350nm，發(fā)射波長460nm。
3. 活細胞或組織染色：
a) 細胞培養(yǎng)物中加入適量Hoechst 33258染色液，約1/10細胞培養(yǎng)基體積，必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對于六孔板一個孔需加入1ml染色液，對于96孔板一個孔需加入100μl染色液。
b) 在 37℃培養(yǎng)細胞 10～20 分鐘。
c) 用 PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。
d) 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長350nm，發(fā)射波長460nm。
相關(guān)文獻：
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Hoechst 33258 熒光染料
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